什么叫PCR實(shí)驗(yàn)室:
PCR實(shí)驗(yàn)又稱(chēng)為臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),是專(zhuān)門(mén)用來(lái)檢測(cè)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測(cè)手段。它可以通過(guò)將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法,測(cè)出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測(cè)方法可以測(cè)出普通檢驗(yàn)難以檢測(cè)出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對(duì)樣品要求低等優(yōu)點(diǎn)。因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可,已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測(cè)部門(mén)的禽疫病診斷。但是,這種實(shí)驗(yàn)需要有能保證絕對(duì)安全、配置合理的實(shí)驗(yàn)室和非常規(guī)范的操作為前提。近年來(lái)對(duì)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來(lái)越得到重視。因些它對(duì)檢測(cè)結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。
PCR實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)計(jì):
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問(wèn)題是如何避免污染,。因?yàn)橐坏┌l(fā)生污染,實(shí)驗(yàn)就必須停止,直到找到污染源為止,而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢,需重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所以發(fā)生污染后在圍繞實(shí)驗(yàn)室來(lái)尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣,浪費(fèi)人力物力。因此要避免污染,首先是預(yù)防,而不是排除。
PCR實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域,進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行
1.試劑配制區(qū);(擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存)
2.樣品處理區(qū);(樣品登記、分裝。核酸提取、保存和加鮮)
3.核酸擴(kuò)增區(qū);(擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定、結(jié)果分析、登記及報(bào)告)
4.產(chǎn)物分析區(qū);
注:如使用全自動(dòng)分析儀,區(qū)域可適當(dāng)合并,3、4區(qū)可合并成擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
PCR實(shí)驗(yàn)室施工基本要求:
室的墻體包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧型線條過(guò)渡;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
1、主體結(jié)構(gòu):
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡(jiǎn)明、美觀大方、密封性好。
2、標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié):
將PCR過(guò)程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴(kuò)增 、產(chǎn)物分析四個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),同時(shí)各區(qū)通過(guò)氣壓調(diào)節(jié),使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
3、消毒:在實(shí)驗(yàn)區(qū)和緩沖區(qū)頂部及傳遞窗內(nèi)部安裝紫外線燈。供消毒用。
在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū),還設(shè)備移動(dòng)紫外線燈,對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。
4、不銹鋼傳遞窗:
試劑和標(biāo)本通過(guò)機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗傳遞,保證試劑和標(biāo)本和傳遞過(guò)程中不受污染(人物分流)。
5、地面:地面建議使用PVC卷材或自流坪地面,整體性好。便于進(jìn)行清掃,耐腐蝕。
6、照明:燈具要選用凈化燈具,能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)
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